二氢血根碱的分离制备及抗炎药效机制研究文献综述

研究和解决的问题：苦地丁是罂粟科（Papaveraceae）植物紫堇（Corydalis bungeana Turcz.）的干燥带根全草，对多种炎症有较好疗效[1]。

目前研究发现苦地丁的主要化学成分为生物碱和黄酮，二氢血根碱为苦地丁主要化学成分之一，本课题组前期研究发现二氢血根碱具有一定抗炎作用， Zhai[2]等发现苦地丁提取物具有良好的体内外抗炎药效。

为了深入研究苦地丁抗炎药效作用，本研究将借助苦地丁原药材分离制备二氢血根碱，以脂多糖诱导RAW 264.7小鼠巨噬细胞建立炎症模型研究二氢血根碱对NF-kappa;B通路的炎症抑制作用，对其抗炎药效加以阐明，为其进一步临床应用提供实验参考。

本实验的研究主要分为两方面：1.以苦地丁为原药材，借助传统柱分离层析手段及HPLC分析鉴定，分离制备二氢血根碱。

2.以LPS（脂多糖）作用于小鼠巨噬细胞建立炎症模型，空白组、模型组及各剂量给药组造模完成后分别取细胞总蛋白，依次测定NF-kappa;B通路Ikappa;Balpha;、p-Ikappa;Balpha;、p65、p-p65含量，考察二氢血根碱对NF-kappa;B炎症信号通路炎症传导的抑制作用，分析二氢血根碱的抗炎药效机制。

研究方法和手段：1. 硅胶柱色谱法：硅胶柱具有柱效高、选择性好及分析速度快等特点，硅胶柱色谱是一种以分配平衡为机理的分配方法。

色谱体系包含两个相，一个是固定相，一个是流动相。

物质根据在硅胶上的吸附力不同而得到分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

2. Western Blot（蛋白质印迹法）：是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。