四倍体丹参（Salvia miltiorrhiza）组织培养体系优化及炼苗移栽技术初探文献综述

研究意义与目的：

本课题拟优化四倍体丹参愈伤组织、丛生芽及生根培养基中激素的配比。选取对诱导愈伤组织、组织分化、生根影响较大的激素种类，考察不同激素浓度对四倍体丹参组织培养的影响。初步探究四倍体丹参组织培养苗的炼苗条件，确保组培苗成活率最高。

研究内容：

1.四倍体丹参组培苗的鉴定

材料来源于中国药科大学遗传育种教研室，对材料染色体倍性做如下鉴定：于8:00至9:00AM取丹参幼嫩根尖，蒸馏水洗3次后用0.2%秋水仙素10℃-20℃预处理2.5h，水洗3次，95%乙醇：冰醋酸= 3:1于-20℃固定3h，依次用95%乙醇，70%乙醇，蒸馏水各洗3次。60℃条件下1mol/L盐酸解离15min，蒸馏水低渗30min，取根尖0.1cm加改良苯酚品红染色2h，压片，镜检。

2.优化NAA浓度，研究NAA对诱导愈伤组织的影响

采用单因子分析法，以MS 6-BA 1.0mg/L的培养基为基础培养基，添加不同浓度的NAA激素，以考察NAA对丹参愈伤组织形成的影响。设置NAA浓度分别为0.3,0.5,0.8mg/L，以四倍体丹参无菌苗的茎、叶为材料，考察NAA对四倍体丹参的启动率、愈伤组织诱导率、成苗率的影响，并筛选最佳NAA浓度。每组实验接种10瓶，每瓶接种3片叶或茎段，重复3次。

3.优化6-BA的浓度，研究6-BA对诱导丛生芽的影响

以MS IAA 0.1mg/L为基础培养基，分别附加6-BA 0.3,0.4,0.5mg/L，考察6-BA对诱导丛生芽的影响。每组实验接种10瓶，每瓶接种3个芽，重复3次。以其增殖倍数为指标，筛选最佳6-BA浓度。

4.优化生根培养基中IAA和IBA激素的浓度，筛选二者的最佳配比