重组Ta1-抗体融合蛋白的制备文献综述

课题背景：

胸腺是机体重要的中枢免疫器官,主要与T细胞的分化及成熟有关,和机体的健康有着密切相关的关系。胸腺随机体的老化而逐渐退化和脂肪化,其功能也随之逐渐减弱。其免疫功能在抗感染、自身免疫性疾病和抗肿瘤中有着重要作用。

胸腺素alpha;1( thymosin alpha;1, Talpha;1) 是由28个氨基酸组成的酸性多肽, 等电点412, 相对分子量 3108, 其氨基酸序列为: N-Ser-Asp-Ala-Ala-Va-l Asp-Thr- Ser- SerGlu- Ile-Thr-Thr-Lys-Asp- Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu- Va-lVa-l Glu-Glu- Ala-Glu- Asn- C. Talpha;1具有免疫增强活性, 可以促进T淋巴细胞的成熟和分化, 促进成熟的T细胞、NK细胞分泌 IL- 2、INF-A等. 此外, Talpha;1还具有刺激血管内皮细胞迁移, 促进血管生成和伤愈合等作用. 目前Talpha;1已用于乙型肝炎、丙型肝炎、恶性肿瘤及免疫缺陷疾病等的临床治疗和研究中. [6]

胸腺肽alpha;1是一种生物反应调节因子, 它可以特异性地诱导T细胞 Lyt1 、2 、3 表面标志的产生, 促使T细胞及自然杀伤细胞( NK ) 的分化与成熟, 促使致敏 的T细胞在各种抗原或有丝分裂原激活后产生各种淋巴因子, 如白介素- 2( I L-2) 等淋巴因子, 促使对IL-2 高亲和力受体的表达增加, 增强Th细胞的功能, 同时它还通过对T4细胞的激活作用来增强异体和自体的人类混合的淋巴细胞反应。胸腺肽1可能影响NK前体细胞的募集,这前体细胞暴露于干扰素后变得更有细胞毒性。使机体能有效的发挥免疫防护功能。[3]

小分子肽的表达通常比较困难，我们采取融合表达方式，构建了Ｔalpha;１融合表达载体。在此基础上，将重组质粒转入大肠杆菌构建工程菌，对工程菌进行发酵培养并进行Ｔalpha;１的分离纯化。[10]

胸腺肽alpha;1分子中不含半胱氨酸，因此无二硫键，无糖基化。本课题通过IPTG诱导大肠杆菌表达重组Talpha;1-抗体融合蛋白，得到的目的蛋白上可以通过镍柱纯化出目的蛋白。并通过对小鼠的体内实验对重组Talpha;1-抗体融合蛋白的抗肿瘤活性进行研究。

实验流程：

1. 重组Talpha;1-抗体融合蛋白的制备