番红花染色体观察文献综述

一、文献综述

1、番红花简介

番红花（Saffron学名：Crocussativus）又称藏红花、西红花，是一种鸢尾科番红花属的多年生花卉。其原产于欧洲南部，明朝传入我国，最早由印度传入西藏，所以又叫藏红花。番红花在欧洲用作香料，伊朗用作染料，中国用作药材。番红花一般以干燥柱头入药，药理学研究表明其具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、散郁开结等功效，最近又发现有良好的抗癌作用[1]。番红花的主要活性成分是苦藏花素，着色物质为藏花素。虽然我国种植番红花的区域较多，但不易结实，一般依赖球茎繁殖，球茎随着繁殖次数增加会越来越小，导致更不易开花结实[1]。

2、染色体简介及染色体分析的目的和方法

染色体本质是脱氧核苷酸，具有遗传性质，在有丝分裂时易被碱性染料染成深色。以番红花染色体为研究对象，进行核型分析，确定其倍性，可为探索番红花不结实的原因提供细胞学依。进行染色体分析时一般以根尖、花粉母细胞、愈伤组织及不定芽为载体。唐湫钥、田如霞等[2,3]研究者分别采用小胡杨花粉母细胞、小叶锦鸡儿花粉母细胞为载体，选取合适的染色剂进行常规压片。小胡杨是将雄枝在10～20℃下进行水培48h后，每隔2～4h采集花芽，去除鳞片，用卡诺固定液固定，4℃保存[2]。小叶锦鸡儿在花蕾期从早晨6时至下午18时，每隔2h取材一次。材料用卡诺液固定12h后，用95%的酒精清洗3次，置70%酒精中，冰箱冷藏[3]。选用愈伤组织及不定芽为载体时需先选择合适的外植体、培养基进行超净接种，愈伤组织的培养，再选取长势较好的进行观察。这部分研究较多，其中很多都是对染色体稳定性的研究或最适合的培养基。

3、花粉生活力测定的目的和方法

进行花粉生活力测定时一般先用花粉进行愈伤组织培养再观察，也可以直接将花粉制片观察，在观察前都需要先进行染色（一般有生活力的花粉可被染上颜色），也可以用花粉萌发试验（一般将花粉管超过花粉粒直径2倍的花粉看作正常萌发的花粉，观察至萌发率不再升高为止），，它可以弥补花粉染色法的不足。发育阶段、培养方式、培养基、干燥方式和贮藏条件等对花粉生活力都有影响。杨琴军等[4]研究者采用采用TTC染色法和固体培养基法对阔瓣含笑、平伐含笑、含笑的新鲜花粉和4℃低温下保存的花粉进行了生活力的测定，结果发现在某一蔗糖浓度下花粉生活力有最大值。杨瑞等[5]研究者采用TTC法对葡萄花粉生活力进行研究，结果表明室内自然阴干是花粉的最佳干燥方式，且花粉贮藏以低温干燥法最好。

培养条件、培养基、染色剂、染色体倍形等条件对花粉育性都有影响。一般所采用的实验方法也是染色剂法和萌发实验法。

4、番红花愈伤组织诱导及染色体倍性和育性研究进展

在进行番红花愈伤组织诱导时，所选用的外植体及培养基在接种前都要先进行消毒工作。将番红花的球茎于自来水中冲洗干净，除去皮膜，置于超净工作台上消毒接种。先于70%酒精中漂洗30s，再用0.1%HgCl2消毒8min，最后用无菌水冲洗4～5次，彻底洗去残余的HgCl2[6]。培养基的消毒是将其在121℃高压灭菌30min。此外培养基中需添加0.6%琼脂，3%蔗糖及不同浓度的植物生长调节剂，调节pH值5.8。选取合适的外植体在超净工作台上接种到培养基中，所有培养均在(251)℃，光照时间12～16h/d，光照强度1500～2500lx进行[6,7]。