流式细胞仪检测rhIL12rβ1受体蛋白抑制Th细胞活性的研究文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一、研究背景

1.自身免疫性疾病

是指机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致组织损伤或器官功能障碍的疾病状态，引起不同类型自身免疫病的发生，往往与自身反应性T和B细胞的异常激活有关。致病因素主要有抗原因素、遗传因素、免疫功能异常细胞因子平衡失调（TH1/TH2）和生理因素等。常用的治疗自身免疫疾病发病的药物，如5-ASA、糖皮质类固醇激素和各种免疫抑制剂等对免疫系统均表现出强大而广泛的抑制作用，但均容易出现严重感染等并发症，且停药后容易复发。因此，寻找一种新的特异的针对炎症连锁反应关键步骤的治疗措施十分必要。

2.TH17细胞

CD4 Th细胞作为免疫应答中的一种重要辅助T细胞，通过作用于免疫系统中的其他免疫细胞而发挥重要作用。20年前，Th1和Th2两个亚类Th细胞被鉴定出并对此进行了大量研究。近年来，人们鉴定出了Th细胞的第三亚群Th17细胞，即表达IL-17的T细胞[1]，Th17细胞不仅在基因编码和表达上不同于其他的Th细胞，它的生物学功能也有很大不同。Th17通过招募受感染组织的嗜中性粒细胞和巨噬细胞而发挥作用，其和Th1细胞在针对感染性病原菌的应答中发挥着不同的作用。随后进一步证明了Th17细胞在天然免疫和炎性病理反应中发挥着关键作用[2]。目前Th17的确切调控机制仍不十分清楚，受多种细胞因子（IL-23、IL-12、IL-6、TGF-beta;、INF-gamma;等）、转录因子（RORgammat）的共同作用影响，具有自己独特的分化、发育途径。TGF-beta;l、IL-6是Thl7细胞分化的启动者[3]，IL-23是Thl7细胞分化的促进者，IL-23在Thl7细胞分化过程中具体的作用机制被认为与STAT-3有关[4]，因为IL-23可以介导STAT-3的磷酸化过程，使STAT-3激活从而促进IL-17的分泌。IFN-gamma;、IL-4是Thl7细胞分化的抑制因子[5]。Socs3是一种重要的Thl7细胞分化的负向调节蛋白，其机制可能是限制了STAT-3的磷酸化过程。Thl7可以产生多种细胞因子，其中最主要的是IL-17。IL-17属于促炎因子，与许多炎症反应和自身免疫性疾病的发生和发展有关[4]，如器官移植排斥反应（allograft rejection）、肿瘤及类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）、系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosis, SLE）、多发性硬化症（multiple sclerosis）、哮喘（pulmonary asthma）等炎症免疫性疾病，这些患者的血清和病变组织中都能检测到IL- 17。因此Th17细胞与自身免疫性疾病密切相关，可以作为一个新的药物作用靶分子。

3.p40家族成员

随着自身免疫性疾病的研究进展, 细胞因子中p40家族成员已越来越引起人们重视, 除了与IL-12和IL-23构成异二聚体, 另外IL-12p40还可以二硫键连接形成同源p40二聚体(p402)或者以单体形式分泌(p40),由于它们共享有p40亚单位, 所以我们可以统称它们为p40家族[6]。p40 家族主要有4个成员, IL- 12(p70)，p40单体(p40),p40 同源二聚体(p402)以及IL-23。p40家族最显著的特征就是共享p40亚基, 并且都和IL-12Rbeta;1受体结合。目前，最快捷最准确的功能研究的实验室方法是基于基因敲除动物模型研究[7]，然而由于p40亚基被四个成员所共享，对于单纯p40基因敲除，实验结果很难去解释，只有针对每一个成员合成特异的单克隆抗体，才能完整准确了解这些p40成员的作用。

3.1 IL-12及其受体

IL-12由p35和p40两个亚单位通过两个二硫键连接，又称IL-12p70。IL-12受体为IL-12Rbeta;1/IL-12Rbeta;2二聚体，主要位于活化的T细胞和NK细胞表面，分别与p40和p35亚单位结合。IL-12Rbeta;1可单独结合配体IL-12，而IL-12Rbeta;2主要发挥信号转导功能，IL-12与其受体的相互作用引起激酶JAK2和TyK2相互磷酸化而激活，进而催化受体发生酪氨酸磷酸化，募集含SH2结构域的信号转导及转录活化因子STAT4、STAT3、STAT1 和STAT5，使其在JAK2和TyK2的作用下发生磷酸化，其中磷酸化的STAT4在胞质形成同源二聚体进入胞核，调节目的基因表达[8]，结合到基因组的启动子区同时也包括INF的管辖区，由此诱导Th0细胞转化为Th1细胞，并产生大量的INF，STAT3还可调节DCs中IL-12p40启动子对NF-kappa;B的募集。IL-12相关细胞因子的基本生物学功能主要是调节NK细胞活化、T细胞增殖和细胞因子的产生以及B细胞抗体产生。同时有研究表明IL-12的过度表达会诱导IFNgamma;和iNOS的水平异常，从而引起Th1介导的组织特异性的自身免疫性疾病的发生[7]。