针对整合素相关蛋白（CD47）特异性阻断的 KR-10-1 多肽药物生物毒性初步研究文献综述

一、课题研究的目的及意义 CD47是一种存在于所有组织的不同细胞且分布于细胞膜表面的高度糖基化的免疫球蛋白样蛋白质，CD47与SIRPalpha;结合后会形成CD47-SIRPalpha;复合通道，可以通过激活这一信号通路向吞噬细胞传递一种别吃我的信号而使肿瘤不被吞噬。

因此通过阻断剂阻断CD47-SIRPalpha;信号通路已经成为了治疗肿瘤的一个重要方向。

二、课题拟研究或解决的问题 本次课题以秀丽隐杆线虫为研究对象，将秀丽隐杆线虫置于不同浓度的KR-10-1的多肽药物实验组与空白对照实验组中，通过比较秀丽隐杆线虫的各项生理特征，来评价药物的生物毒性，为特异性阻断CD47的多肽类药物的研究提供实验依据，为疾病治疗提供全新手段。

三、拟采用的研究手段1.线虫培养1.1培养材料：大肠杆菌OP50作为食物1.2培养基：NGM培养基（配置方法：1L水中加入3gNaCl、2.5g蛋白胨和17g琼脂；热压灭菌后，加入1ml 1mol/LCaCl2，1ml 1mol/LMgSO4，1ml2mg/ml尿嘧啶，1ml胆固醇溶液（5mg/ml乙醇）和25ml 1mol/LKPO4buffer）1.3 培养方法：采用M9缓冲液（1L水中加入3gKH2PO4、6gNa2HPO4、5gNaCl和1ml 1mol/LMgSO4）将虫体洗净，10000r/min离心10s，然后弃置上清液，沉淀物用M9缓冲液重悬后再次离心，弃置上清液。

取200mu;l沉淀物接种到涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上，置于16C培养箱中培养72h后即看见成虫和幼虫。

2.毒性评价通过对药物实验组和空白对照组中的线虫的致死率、孵化率、身体弯曲频率、头部摆动频率以及育雏数等生理特征来评价药物的急性毒性、慢性毒性和生殖毒性。

3.数据处理实验结果用SPSS进行数据的处理，以xs表示，同时对实验组和对照组间差异性分析采用T检验进行分析，P＜0.05和P＜0.01被认为是有差异性和显著性差异。

4.结果分析根据T检验所得的结果对药物的生物毒性进行分析。

四、文献综述摘要：CD47是一种广泛分布的细胞膜蛋白，通过与SIRPalpha;结合，给吞噬细胞传递一种别吃我的信号，进而能够抑制免疫细胞的吞噬作用。