青霉素V钾片含量测定的分析方法验证文献综述

一、理论意义青霉素V钾属于beta;-内酰胺类抗生素,分子结构主要由beta;-内酰胺环和四氢噻唑环组成，抗菌谱与青霉素G相似，能够破坏细菌细胞壁,具有杀菌作用,是治疗革兰阳性菌及部分阴性菌感染的首选药物[1]。

青霉素 V 钾是利用青霉素母核分子中的氨基与酰化剂进行酰化反应制得，其特性为对酸稳定，易溶于水，其水溶液为酸性，口服吸收好[2]。

当利用高效液相色谱法（HPLC）测定青霉素V钾片的含量时，由于所用填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶为大极性化合物，对酸性青霉素V钾溶液具有强吸附性，这就导致了供试样品和对照品主峰易发生拖尾，进而影响分析结果。

我们主要对比了USP43、EP10.0、BP2021、JP17及中国药典2020，通过一系列筛选，最终筛选出了《欧洲药典10.0》的含量测定分析方法。

与2020版《中国药典》关于青霉素V钾含量测定分析方法相比，应用《欧洲药典10.0》青霉素V钾含量测定方法，塔板理论数和柱效更高，拖尾现象减弱，峰高较高，峰形更好，有更好的分离度，从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性。

2020版《中国药典》关于青霉素V钾片含量测定：色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以pH3.5磷酸盐缓冲液(取0.5mol/L磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH值至3.5)-甲醇-水(10:30:60)为流动相A,以pH3.5磷酸盐缓冲液-甲醇-水(10:55:35)为流动相B,先以 流动相A-流动相B(60：40)等度洗脱,待青霉素V峰洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱,检测波长为268nm;进样体积20mu;l；系统性适用要求指出青霉素V钾峰和青霉素峰的分离度应大于6.0[3]。

10.0版《欧洲药典》关于青霉素V钾含量测定：色谱条件使用十八烷基键合硅胶为填充剂；以pH3.4的磷酸盐缓冲液-甲醇-水（10:30:60）为流动相A，以pH3.4磷酸盐缓冲液-甲醇-水（5:60:35）为流动相B，按下表进行线性梯度洗脱；柱温为50℃；流速为每分钟1.5ml；检测波长为254nm；进样体积为20ul。

系统适用性要求，各杂质间的分离度均符合规定并与标准图谱一致；对照品溶液色谱图中，主成分色谱峰拖尾因子应在0.8-1.5之间；灵敏度溶液色谱图中，主成分色谱峰高的信噪比应不小于20。

其中流动相A和B分别为pH3.5磷酸盐缓冲液-甲醇-水（10:30:60）和pH3.5磷酸盐缓冲液-甲醇-水（10:55:35）[4]。