开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
研究或解决的问题
质粒是一种能遗传与编码与耐药性有关的遗传物质, 随着研究的深入, 已被用于细菌种属鉴
定, 耐药性检测及同源性等分析. 目前用于细菌质粒提取的方法不少, 但稳定性差, 时有核DNA的渗入或质粒的损伤干扰,本实验通过比较碱裂解法,试剂盒法,煮沸法等提取大肠杆菌质粒的方法的效果,优化实验条件,以获得最佳提取效果。
采用的研究手段
碱性裂解法
溶液1: 50mmol/ L 葡萄糖, 1mol/ LTris[ pH8. 0] , 0. 5mol/ L EDTA[ pH8. 0] , 溶菌酶10mg
溶液2: 0.2mol/ L NaOH, 20%SDS;
溶液3: 5mol/ L 乙酸钾, 5mol/ L 冰醋酸, 使最终溶液中含有3mol/ L 钾和5mol/ L乙酸;
TE 液: 10mmol/ L T ris- HCl, 1mmol/ L EDTA( pH8. 0) 。
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