一、课题背景亚硝酸盐是氮循环过程中重要的产物,广泛存在于自然界中,例如水体、土壤、蔬菜、水果中都含有一定量的亚硝酸盐。
除天然来源外,食品中的亚硝酸盐主要是由食品中的硝酸盐在微生物作用下转化来的。
亚硝酸盐是一种对人体有害的强毒性物质,在适当条件下可与食物或胃中共存的仲胺类物质发生反应生成致癌物亚硝胺,可诱发人体多种癌症。
因此,利用化学、生物技术的方法来降低食品和水中亚硝酸盐含量一直是研究的热点。
植物乳杆菌是乳酸菌的一种,最适生长温度为30至35,厌氧或兼性厌氧,菌种为直或弯的杆状,单个、有时成对或成链状,最适pH6.5左右,属于同型发酵乳酸菌。
由于植物乳杆菌的细胞内含有丰富的蛋白质和维生素,所以经常做成高级营养品添加到食品中。
据研究,植物乳杆菌能够在亚硝酸盐的降解中起到相应作用,本实验研究植物乳杆菌在不同条件下对亚硝酸盐的清除作用以及植物乳杆菌对亚硝酸盐降解条件的优化。
二、要解决的问题1、考察不同接种量对降解亚硝酸盐的影响2、不同培养时间植物乳杆菌降解亚硝酸盐的差异比较3、植物乳杆菌在不同pH下降解亚硝酸盐的差异比较4、不同NaCl含量对植物乳杆菌降解亚硝酸盐的影响比较5、选取影响最显著的三到四个因素进行正交试验,得出最优条件三、实验流程→ 绘制亚硝酸盐标准曲线→不同接种量对亚硝酸盐降解能力的研究→不同培养时间对亚硝酸盐降解降解能力的研究→不同pH条件下对亚硝酸盐降解能力→不同NaCl含量对亚硝酸盐降解能力的研究→根据上述步骤所得结果进行正交试验四、研究方法和内容1、亚硝酸盐标准曲线的制备准确称取0.1000g亚硝酸钠,加水溶解后在500mL容量瓶中定容,分别吸取0.00mL,0.20mL,040mL,060mL,0.80mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL,2.50mL亚硝酸钠标准使用液,置于50mL具塞容量瓶中,分别加入2mL 4g/L的对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后各加入1mL 2g/L的盐酸萘乙二胺溶液,混匀,静置15分钟后于波长538nm处测定吸光度。
2、考察不同接种量对植物乳杆菌降解亚硝酸盐的影响 配制植物乳杆菌液体培养基1L,在其中加入亚硝酸钠使浓度为200mg/L,加入0.5%的NaCl,充分混匀后,分成5份,每份200mL。
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