开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、 研究的背景
基因治疗(gene therapy)是指将外源正常基因导入靶细胞,纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,达到治疗目的。也包括转基因等方面的技术应用。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中,使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说,基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。基因治疗技术是随着DNA重组技术的成熟而发展起来的,它是当代医学和生物学的一个新的研究领域,可以通过一定的方式将正常的基因或者有治疗作用的DNA序列导入靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用,从而达到治疗疾病的目的。
基因载体问题,以及与载体相关的免疫反应、细胞毒性与安全性等问题是基因治疗领域亟待解决的关键问题之一。介导基因递送的载体一般分为病毒型载体和非病毒型载体。病毒型载体的缺点在于制备复杂,有免疫原性,不能体内反复应用,存在安全性隐患以及非导向性,必须进一步改善。非病毒载体是病毒载体的重要补充途径,其体外实验应用较多。尽管非病毒载体转染效率目前较低,但非病毒载体由于具有低毒,低免疫反应,靶向性和易于组装等优点被寄予厚望。
非病毒载体包括多种方式,如:裸质粒、脂质体、纳米粒以及其他。脂质体依它的低毒性的优点备受期待。本研究意利用非病毒载体的优点,使用类脂质材料将药物包裹。实现药物的靶向传递进入病灶细胞,释放药物,达到治疗疾病的目的。因非病毒载体的低毒性,低免疫等特点,所以对病人的副作用较小;但因转染效率低,治疗效果总是不尽人意。所以本课题面临的另一个问题就是如何提高转染效率。
二、 具体方法
非病毒载体的构建
PEI 800与环氧十五烷在90℃的条件下反应48-72小时,可以得到非病毒载体。
表征
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