课题背景:
结肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,常发生在直肠与乙状结肠交界处,以40~50岁年龄组发病率最高,男女之比为2~3:1,发病率占胃肠道肿瘤的第3位,症状主要表现为腹胀、消化不良,出现黏液便或黏液脓性血便。近年来,随着人们饮食结构和生活环境的改变,其发病率和死亡率更是呈上升趋势。而目前的相关的治疗手段主要采用化疗和放疗的联合治疗方式(手术除外),但大多数化疗药物具有严重的毒副反应,因而限制了其在临床上的进一步应用。因此,开发新一代有效、安全、经济的抗肿瘤药物,是目前研究的重点。
黄芩苷是黄芩抗肿瘤作用的主要物质基础,有研究报道其可通过影响肿瘤细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制蛋白酶体,以及诱导肿瘤细胞自我吞噬来抗凋亡,但主要作用是通过不同的凋亡途径来实现的。目前,众多的文献报道中发现,黄芩苷可通过影响肿瘤细胞周期,从而阻止DNA的合成,诱导肿瘤细胞凋亡,其主要是通过活化Caspase酶系,上调促凋亡基因p53,Bax,下调Bcl-2诱导肿瘤细胞凋亡,改变线粒体膜的通透性,使线粒体内的物质激活Caspase酶系,最终诱导肿瘤细胞的凋亡。
在发现中药单体黄芩苷能诱导细胞衰老后,又有研究表明在结肠癌组织中胃泌素释放肽受体GRPR会高度表达,因此我们产生这样的疑问,在黄芩苷诱导的结肠癌细胞衰老过程中GRPR又会扮演着什么样的角色。本实验通过细胞活性分析,SA-beta;-Gal染色检测以及Western Blot检测来研究相关问题。
预期实验方法:
1.预期实验材料
1.1细胞系 结肠癌细胞系HCT-116
1.2 试剂 纯度为98.5%的黄芩苷标准品,DEME 培养基 ,胎牛血清 ,青霉素-链霉素浓缩液,胰酶 ,DMSO, 细胞衰老beta;-Gal染色试剂盒,MTT试剂,Western Blot 试剂
1.3实验仪器设备
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