硫肽类抗生素硫肽-W2020的发酵条件优化文献综述

课题解决的问题

自从1928年青霉素被发现以来，许多抗生素已经被开发和用于治疗细菌感染，挽救了数以百万计人们的生命。但是由于抗生素滥用等问题，耐药菌的出现和增多正成为全球公共卫生面临的日益严重的威胁。因此，考虑到治疗方案的严重局限性，发现和开发具有新作用机制、可用于有效治疗多重耐药细菌感染的抗生素迫在眉睫。诺西肽是一种原型硫肽抗生素，具有一个特征的大环核心，含有一个6元杂环中心到多个唑(In)ES和脱氢氨基酸，在体内和体外对于革兰氏阳性菌具有优异的抗菌活性^[1]。本实验拟利用放线菌Actinoalloteichus sp生产一种诺西肽类似物，然而由于其催化效率较低，无法满足规模化制备，因此本研究拟采用面响应法对其发酵条件进行系统优化。

研究方法和技术路线

1）分别从碳源、氮源、添加的无机盐种类、添加的氨基酸种类进行单因素实验，并通过响应面法处理实验所得数据，分析出最佳发酵条件。

以可溶性淀粉，K₂HPO₄,蛋白胨，牛肉浸膏，MgSO₄,琼脂粉，FeSO₄7H₂O，KNO₃在30℃的平面培养基中培育三天并作为发酵种子。

收集产物可采用萃取、旋转蒸发等方式。

产物检测采用HPLC法，流动相A（含0.1%三氟乙酸的水）和流动相B（含0.1%三氟乙酸的乙腈）柱温设定为40℃，流速为1ml/min。并进行紫外检测。

摇瓶发酵培养基应包含碳源、氮源、无机盐、氨基酸，并将1ml的种子液加入含50ml培养液，并在此之前在115℃下消毒30分钟。

5）潜在营养因素的筛选：以蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、甘油、碳酸钙为基础发酵液，并进行一系列的单因素实验旨在选择最佳的潜在碳源、氮源、无机盐和生长因子优化。碳源筛选:在基础发酵培养基中加入葡萄糖，麦芽糖，乳糖，可溶性淀粉，玉米淀粉，甘油，糊精,乙酸钠，碳酸钠，浓度为40gL¹，分别配置，同时，所有其他媒介构成部分曾经保持不变。氮源筛选：黄豆粉，酵母提取物，蛋白胨，(NH₄)₂SO₄,牛肉膏，玉米浆。无机盐优化：FeSO₄, MgSO₄,CaCl₂,ZnCl2等。氨基酸优化：丝氨酸，苏氨酸，半胱氨酸，谷氨酸，甲硫氨酸等。