新型铂类抗肿瘤药的体外药效药代评价研究文献综述

一、 研究原因目前癌症是世界上发病率及致死率最高的疾病之一，铂类药物因抗癌谱广、疗效显著而在临床上被广泛应用，但其严重的毒性作用及耐药性成为铂类药物的最大问题，如顺铂的肾毒性和听力毒性、奥沙利铂的神经毒性和卡铂的骨髓抑制等[1、2、3]。

这些不足促使人们投入巨大努力去寻找低毒、无耐药性的新铂类药物，为此本实验对新型的四价铂类药物进行体外的药效和药代的研究评价，希望可以找到低毒且无耐药性的新铂类药物，更好地满足癌症病人的需求。

二、 研究手段 在药效方面，对改造后的四价铂化合物在A2780（人卵巢癌细胞）、HepG2（人肝癌细胞）等癌细胞以及L-O2正常细胞中使用cck-8试剂进行细胞毒性实验探究，确定目标化合物的IC50值，并以顺铂作为对照组，对比药效。

在药代方面，用ICP-MS检测总铂元素含量，绘制标准曲线，再与检测出的样品中药物浓度绘制药物浓度-时间变化曲线及计算药代动力学参数；LC-MS/MS检测可能的原药含量。

三、 研究内容及操作流程对作为新药候选化合物的新型的四价铂化合物进行前期研究，研究内容包括体外细胞试验的细胞凋亡研究以评价其抗肿瘤活性；体外细胞摄取试验以评估其药代动力学研究，以找到低毒且耐药性小的铂类药物，解决临床上的抗癌药物毒性大的特点。

（一）体外药效评价研究对冻存管中的A2780（人卵巢癌细胞）、HepG2（人肝癌细胞）等癌细胞进行解冻复苏培养，并更换培养液传代培养，再将细胞随机均匀接种到孔板中，然后用不同浓度的改造后的四价铂化合物分别处理癌细胞及正常细胞。

接下来，用CCK-8分析试剂盒确定细胞活力。

将CCK-8溶液添加到孔板的每个孔中。

温育一段时间后，通过酶标仪在450 nm处检测细胞吸收[4]。

（二）体外药代评论研究对离体的癌细胞及正常细胞进行给药，并在多个时间节点上取一定量的培养液进行处理（及时加入足量的培养液），之后用ICP-MS检测铂元素的含量，同时再配制标准溶液，测定信号强度（每个点测三次，取平均值），结合溶液溶度，绘制标准曲线；再依照标准曲线和测出的铂元素含量计算出样品中的药品浓度，最后绘制药物浓度-时间变化曲线，最后用LC-MS/MS检测可能的原药含量，判断以原形排泄的量。