毕赤酵母表达目的蛋白过程中降解的研究进展摘要:巴斯德毕赤酵母表达系统是近几十年发展起来的真核表达系统,是目前最为成功、应用最广的系统之一。
与现有的其他表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面具有明显优势。
但是在表达目的蛋白的过程中蛋白质降解是一个主要问题,多数研究者们研究了不同的PH和温度等工艺对表达过程中蛋白稳定性的影响,提出了一些抑制蛋白质降解的方法。
关键词:毕赤酵母降解优化1.1毕赤酵母巴斯德毕赤酵母表达系统是20世纪80年代初期发展起来的一种新型的外源蛋白表达系统。
由于它既有原核表达系统操作简易、易于培养、生长速度快、表达量高、成本低等优点,还具有原核生物表达系统所不具有的对外源蛋白的翻译后修饰等特点,如糖基化、蛋白磷酸化等。
同时它还避免了酒酿酵母分泌效率差、表达菌株不够稳定、表达质粒易丢失等缺陷,所以毕赤酵母表达系统很快成为目前最优秀、应用最广泛的外源蛋白基因表达系统之一,已经有数百种外源蛋白被成功表达,而且数目不断增加。
巴斯德毕赤酵母由于在其细胞的过氧化物酶体中含有甲醇代谢途径所必需的酶,如醇氧化酶、过氧化氢酶、二羟丙酮合成酶等,所以可利用甲醇作为唯一碳源和能源。
此外由于巴斯德毕赤酵母能够在简单的培养基上高密度发酵生长,所以它最初是用于制药工业的甲醇营养型酵母,主要用来生产单细胞蛋白质。
1.2降解的途径真核细胞内蛋白质的降解途径主要有三种,溶酶体途径、泛素化途径和胱天蛋白酶(caspase)途径。
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