综述
乙型肝炎是由乙肝病毒( hepatitis B Virus，HBV) 引起的一种死亡率较高的传染性疾病。HBV感染已成为危害人类健康的重要疾病之一［1］。乙型肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的一种全球性分布的传染病，全世界近20亿人感染过乙肝病毒，其中3亿左右成为慢性感染者。中国是乙型肝炎的高发区，有1.2～1.3亿人感染乙肝病毒，其中慢性乙型肝炎病人（CHB）约为3000～3500万人，这当中就有10%～40%可发展为肝硬化，1%～5%可演变为肝癌。每年死于相关性肝病（包括肝癌）约50～80万人。如果乙肝病毒通过垂直传染或在婴儿时期感染，则90%以上会成为慢性HBsAg携带者，严重影响下一代的健康，危害极大。治疗乙型肝炎的目的在于维持肝功能的稳定，尽可能清除体内病毒。
马蹄金为旋花科植物马蹄金属植物马蹄金( Dichondrarepens Forst． ) 的全草，具有清热解毒、利水活血等功效，主治黄疸型肝炎、胆囊炎、痢疾、泌尿系感染及结石等［2］苗族药马蹄金( Dichondra repens Forst． ) 在民间广泛用于慢性乙型肝炎的治疗。从苗族药马蹄金中发现的具有较强抗乙肝病毒活性的肽类化合物马蹄金素［N－(N -苯甲酰基－L－苯丙氨酰基)－O－乙酰基－L－苯丙氨醇］，是一类新型的抗乙肝病毒化合物，有较好的理论价值和应用前景［3-5］.Y101(专利号:CN02160309.X)是从民族药马蹄金(Dichondra repens Forst.)中分离得到的一种具有抗乙肝病毒活性的苯丙氨酸二肽类化合物, 是马蹄金素的衍生物[ 2、6 -7] 。
替芬泰是从马蹄金属植物马蹄金中分离得到的具有抗乙肝病毒活性的单体马蹄金素经过结构修饰得到的一个具有较强抗HBV活性的衍生物之一。在临床前研究部分，通过2.2.15肝细胞模型和乙肝感染鸭模型对该化合物进行的药效学初步研究结果表明，该化合物对2.2.15细胞上清液中的HBsAg和HBeAg的分泌有显著的抑制作用，同时，可以有效抑制HBV-DNA的表达，并能够有效抑制鸭原代肝细胞的DHBV-DNA活性。对感染乙肝病毒的雏鸭，该药可以有效抑制DHBV-DNA的表达，具有抗DHBV的活性，作用稳定，存在量效关系。另外，小鼠肝损伤模型的实验表明，该化合物还具有显著的保肝降酶作用。随后的一系列动物实验和相关体外试验正在对该药作用机制进行进一步的研究。
Y101 对alpha;-萘异硫氰酸酯致小鼠黄疸型肝损伤具有保护作用且对 CnoA 致小鼠免疫性肝损伤具有保护作用，其作用机制可能与抗氧化作用有关[4、5]；对CCl4所致慢性肝损伤具有较好的防治作用,保肝降酶效果明显,其机制可能与抑制 Hy P增多,降低MDA,NO和升高SOD, GSH有关[3]；对HepG2-2．2．15细胞内HBV-DNA有显著的抑制作用，有效浓度为12.5mu;gml－1，最佳浓度为50mu;gml－1[8]; 对OATP1B1 和OATP2B1两种转运体有弱的抑制作用,且Y101可能不是PEPT1、 OATP1B1和OATP2B1的底物[9]，可能不会在联合用药的过程中发生基于CYP 酶抑制或诱导的代谢性相互作用的优势[10]。上述结果不仅可以用来解释 Y101 给药后对动物体的作用机制, 而且可以为 Y101 的进一步开发提供理论依据。
在另外一系列实验中，Y101已经从体内外对其抗病毒药效进行了全面的抗病毒研究，证实Y101 对乙肝病毒有着很好的抑制作用。[11]Y101也体现出可以有效的抑制 DHBV-DNA的表达:从体内外对DHBV-DNA 进行研究，结果表明，体内试验Y1010. 05、0.025gkg－1剂量组对血清中DHBV-DNA有明显的抑制作用，且停药后反弹作用比阳性药拉米夫定明显降低; 体外实验Y10180、60、40mgL－1浓度对原代鸭肝细胞的DNA 均有明显的抑制作用，浓度越高抑制作用越明显。体内外实验均提示Y101 具有抗DHBV 活性，且作用稳定，存在量效关系。[12]而从对正常小鼠的实验来看。Y101有促进正常小鼠非特异性免疫和体液免疫功能的作用。[13]
本研究应用于该药的首次临床试验研究中，作为1.1类新药，这是首次对其人体尿液样本建立LC-MS/MS分析方法。
在方法学方面之前的相关研究中，有以正相高效液相色谱法，采用CHIRALPAKAD － H 手性柱，流动相为正己烷－异丙醇－二乙胺( 85∶ 15∶ 0. 1) 对Y101 片剂中的3 个光学异构体进行了含量测定。结果表明，该法的分离度和重复性好，且操作简便，建立了专属性强、准确、可靠的异构体检查方法，可有效控制Y101 片剂的质量。【14】更进一步的有对优化的Lc-ms/ms法进行了验证，在加入苯海拉明(内标，IS)后，用蛋白质沉淀对血浆样品进行预处理，在亚特兰蒂斯号上进行色谱分离。分析柱(4.6 mm100 mm，5m，水)，甲醇：20 mm甲酸铵，以1.0%甲酸(65：35，v/v)为流动相，流速0.4 ml/min，共7.5 min，在m/z 490.2处进行多反应监测(MRM)。→339.5日元101和m/z 256.0。→167.0 for在SciexAPI 4000质谱计上的电喷雾电离正离子模式，保证了测定大鼠血浆中Y 101的可靠性，证明该方法简单、灵敏，主要优点是制备样品的一步沉淀方法简单，易于实施，可用于相关的常规实践。【15】
Y101在大鼠体内的代谢特性在之前的文献中，采用一种可信赖的五步走策略，包括多种扫描模式的QTRAP MS/MS和各种获取QTOF MS/MS数据挖掘工具的成功，充分用于系统地表征Y101的代谢产物。QTOF MS/MS是作为分析靶向代谢物和小代谢物的补充工具，并验证了这些工具的有效性。结果采用五步法结合工作流程，共检测到了30种代谢物【16】。这是第一次研究Y 101的代谢，对更好地了解Y 101在大鼠体内的代谢命运具有重要意义，可作为临床药理学的参考。
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