人参抗疲劳活性部位制备工艺优化及活性验证文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

1. 课题研究内容

人参是五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥根，是我国传统的名贵中药材[1]，具有调气养血、大补元气、安神益智、生津止咳等功效，被誉为“百草之王”。人参的化学成分包括人参皂苷（ginsennosides）、人参多糖（ginseng polysaccharides）和多种活性肽等等，其中人参皂苷是人参中最重要的有效成分^[2]。经研究发现人参多糖和人参皂苷在抗疲劳方面都有所成效^[3,4]，已证明人参皂苷Rg1作用显著，给大龄老鼠腹腔注射20、40 mg/kg人参皂苷Rg1连续10d，发现大鼠方格间穿行次数和直立次数明显增加，结果提示其可改善老龄动物衰退的活动能力^[5]。经前期研究发现，人参提取物中含有对羟基苯甲酸，而对羟基苯甲酸也具有抗疲劳作用。本实验以人参皂苷Rg1和对羟基苯甲酸含量为指标，着重于抗疲劳活性部位人参皂苷的工艺优化。人参提取方法有水煎法、温浸法、回流法以及超声提取法等，利用传统方法提取费时费力，不符合优化方向， 而利用超声波技术来强化提取分离过程，可有效提高提取分离率，缩短提取时间、节约成本、甚至还可以提高产品的质量和产量。故本实验对人参超声提取的影响因素进行工艺优化。

1. 课题研究方案

1、实验方案

影响超声提取的因素有溶剂种类、溶剂浓度、超声时间、超声温度、超声功率以及提取次数等，通过文献查阅，决定用甲醇和乙醇两种不同的提取溶剂，以溶剂浓度、超声时间、超声温度和提取次数为考察因素，每个因素三个水平，按L₉(3⁴)正交表进行实验探讨超声提取法的最佳提取工艺^[6-11]。再以最佳提取工艺进行精密度试验、稳定性试验、重复性试验以及加样回收实验。

2、实验内容

（1）标准曲线的制备

a.人参皂苷Rg1标准曲线的制备：精密称取人参皂苷Rg1标准品40 mg，用4 ml 90%甲醇溶解，吸取0.2ml溶于1.8 ml 90 %甲醇溶液制得人参皂苷Rg1标准溶液，以高效液相色谱分别进样1 ul，2 ul，4 ul，8 ul，12 ul，20 ul进行定量分析绘制人参皂苷Rg1标准曲线。

b.对羟基苯甲酸标准曲线的制备：精密称取对羟基苯甲酸标准品20 mg，用4ml 90%甲醇溶解，吸取0.2 ml溶于1.8 ml 90%甲醇溶液制得对羟基苯甲酸标准溶液，以高效液相色谱分别进样1 ul，2 ul，4 ul，8 ul，12 ul，20 ul进行定量分析绘制对羟基苯甲酸标准曲线。

（2）样品溶液的制备

取过5号筛粉末5 g溶于50 ml提取溶剂中，在超声微波仪100 W下超声； 抽滤，抽滤液于旋转蒸发仪中浓缩；浓缩液转移至西林瓶，置于水浴锅上挥干；10 ml 90%甲醇溶解，离心后分装成5份，置于水浴锅上挥干；取一份用1ml90%甲醇溶解制成样品溶液，0.22 ul有机滤膜过滤后HPLC定量分析，计算人参皂苷Rg1和对羟基苯甲酸得率。