天然产物柠檬苦素类逆转肿瘤多药耐药的研究文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

研究背景及意义:

癌症是严重影响人类健康的四大杀手之一，是以不可控制的恶性细胞生长和扩散，以及组织浸润为特征，并经病理检验确定符合国家卫生部公布的疾病和死因分标准归属于恶性肿瘤之列的疾病。全球最常见的癌症发病为肺癌、乳腺癌和结直肠癌。而药物耐受是影响肿瘤化疗疗效的最大障碍,有些肿瘤一开始就对化疗药物有耐药性,有些则是经过化疗后诱导产生,两者都有相同的生物学基础。P糖蛋白作为能量依赖性药物泵,可主动将细胞内药物泵出(如蒽环类、长春碱类和表鬼臼素类等),使细胞内药物减少,从而产生对多种化疗药物的耐药性。P糖蛋白表达多见于那些对化疗不敏感的肿瘤。曾有研究提示,柠檬苦素可以部分逆转人乳腺癌细胞对阿霉素的抗药性。

研究综述:

柠檬苦素存在于柠檬或其他柑橘类水果中，性状呈纯品白色、味苦，结晶状，提取来源于柑橘、葡萄柚、柠檬、橘子，溶解性为易溶于酯性有机溶剂，难溶于水，在甲醇、乙醇中溶解度较大，保存状态为保持贮藏器密封、储存在阴凉、干燥的地方，确保工作间有良好的通风或排气装置中。柠檬苦素具有抗肿瘤、昆虫拒食、抗病毒、镇痛、抗炎、催眠等多种生物活性。2010年，欧洲科学家调查了各类癌症患者共计1万多人，统计他们对于柑橘属水果的食用频率和数量，并跟非癌症患者做比较，结果发现，消化系统癌症和上呼吸道癌症患者食用柑橘属水果的量明显少于非癌症患者。一些日本科学家则采用了追踪病例的方式，在1995-2003年间追踪了4万多名日本成年人食用柑橘属水果的情况与患癌症的比例，结果发现吃柑橘属水果越多的人群中患癌症的比例越小。柠檬苦素在抑制癌细胞生长方面有一定效果，有研究显示这一成分能抑制多种癌症细胞系生长，其中包括白血病细胞、宫颈癌细胞、乳腺癌细胞和肝癌细胞等。多药耐药( multidrug resistance，MDR) 是指肿瘤细胞长期接触某一化疗物后可产生对此种化疗药物耐药性，而且可对其他结构和作用机制不同的多种化疗药物产生交叉耐药性。多柔星( Doxorubicin) 是乳腺癌化疗的常用药物，乳腺癌细胞的对多柔比星产生耐药是多柔比星化疗失败的主要原因，也是影响临床肿瘤患者预后的重要因素。乳腺癌是排名第一的女性常见恶性肿瘤，寻找克服乳腺癌MDR的药物或方法成为当前肿瘤研究的热点。目前研究发现MDR的有效抑制剂有维拉帕米、环孢素A、三苯氧胺、类固醇激素等，但这些耐药逆转剂干扰传统的抗癌药物药代动力学，且由于可引起严重的毒副作用等，至今都未取得预期的临床效果，因此在临床上被限制使用。寻找低毒高效且与合用的抗肿瘤药物无药动学交互作用的抑制剂，以提高药物的利用度，避免和降低药物的不良反应在指导临床抗肿瘤个体化治疗方面具有重要意义，同时也是当前肿瘤耐药性研究中的重要发展方向。

研究方法:

1　材料和方法

1.1　主要材料

　　人乳腺癌MCF-7/ADR、MCF-7细胞；柠檬苦素；碘化丙啶(propidium iodide，PI)、噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT]AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡检测试剂盒、鼠抗人P-gp单抗、鼠抗人GAPDH单抗、鼠HRP标记羊抗鼠二抗、即用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR，RT-PCR)扩增试剂盒(Taq)Taq DNA