苏打水对高尿酸血症及痛风预防作用的研究文献综述

课题名称 苏打水对高尿酸血症及痛风的预防作用课题性质 radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究拟研究或解决的问题本研究拟通过氧嗪酸钾促进尿酸生成的慢性高尿酸血症小鼠模型，考察苏打水是能抑制尿酸的生成，还是促进尿酸排泄，从而降低血尿酸值，达到预防高尿酸血症的目的及其作用机制；并通过造急性痛风性关节炎大鼠模型，从药效学角度探究苏打水对痛风是否具有预防作用。 采用的研究手段（1） 试剂盒检测生化指标空白组自由饮水14d，；名仁苏打水A-G7组自由饮用对应配方名仁苏打水14天；模型组、名仁苏打水A-G7组、阳性组于实验第8天按0.1ml/10g的给药体积用5%的氧嗪酸钾腹腔注射造模连续7天；阳性组按0.1ml/10g的给药体积每隔2天灌胃别嘌醇。 于第13天各组小鼠上代谢笼收集24h尿液，记取尿量，收集完尿液后ip氧嗪酸钾，1h后将小鼠摘眼球取血（严格控制在一个小时内），静止半小时后离心，小心吸取上清液。 按照南京建成尿酸、肌酐、尿素氮试剂盒检测方法检测。 取小鼠肝脏 0.1g加生理盐水制成10% 组织匀浆，离心取上清液测定蛋白浓度，XOD 浓度。 （2）苏木素-伊红（HE）染色法检测肾功能取右肾，置于10%的甲醛溶液中固定，脱水，常规石蜡包埋，包埋后肾脏纵切以观察肾门、肾盂结构，HE染色，封片，于显微镜下观察组织切片。 （3）蛋白质印迹（Western Blot）检测肾脏蛋白的表达快速的在冰台上取肾脏皮质组织,立即用液氮冷冻并-70℃保存，用于WB分析mGLUT9蛋白表达情况。 （4）观测造模后的痛风性关节炎大鼠的行为学：步态和肿胀度 空白组不造模，不用药；模型组只造模，不用药；阳性组给予秋水仙碱 lmg/kg灌胃，苏打水7种配方组自由饮水14天，第14天模型组、苏打水7种配方组、秋水仙碱组大鼠用 75%乙醇消毒右后肢小腿踝关节，用注射针在大鼠右后踝关节背侧45方向插入至胫骨肌腱内侧，感觉有落空感后将充分混匀的 0.1 mL 尿酸钠混悬液注入到关节腔内，缓慢拔出针头，防止尿酸钠混悬液漏出。 空白对照组右后肢小腿踝关节注射等体积生理盐水。 造模后步态观察:1级为正常步态;2级为足着地减轻,轻度跛行;3级为明显跛行;4级为足完全离地,三足步态。 造模后1,4,8，24,48h测肿胀度。 （5）ELISA 检测痛风性关节炎大鼠血浆测IL-1beta;和 TNF-alpha;水平8 h，48h用玻璃毛细管从各大鼠眼底静脉丛取血，静止半个小时后，分别3500 rmin-1离心 15min 以分离血浆（加抗凝素），小心吸取上清液。 测IL-1beta;和 TNF-alpha;水平，IL-1beta;、TNF-alpha; 检测均采用 ELISA 法严格按照试剂说明书进行操作。 （6）HE染色检测痛风性关节炎大鼠的踝关节滑膜组织取大鼠踝关节滑膜组织，10%中性福尔马林溶液中固定，梯度乙醇脱水，透明，常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察组织病理形态学改变。 文献综述摘要：高尿酸血症和痛风给患者带来巨大的困扰，引起尿酸浓度升高、急性或慢性痛风性关节炎、肾脏病变等病理过程。 近年来，多项研究表明中药对高尿酸血症和痛风具有预防作用，且与西药相比具有更小的毒副作用。 由此可见中药在预防高尿酸症和痛风具有明显的优势和良好的前景，本文对近年来中药预防高尿酸血症和痛风的研究做一综述。 关键词：中药、高尿酸血症、痛风高尿酸血症[1]是一种嘌呤代谢紊乱性疾病，由于体内尿酸生成增多或排泄减少所致。 当血尿酸浓度超过饱和（体温37℃时为416mol/L）时，引起急性关节炎发作、痛风石形成及肾脏病变[2]，称为痛风。 急性痛风性关节炎[3]的发作机制十分复杂，其患者[4]的主要病理改变是沉积在关节腔MSU被吞噬细胞、白细胞等吞噬后，破坏细胞的溶酶体等细胞器，之后释放出蛋白水解酶、组胺、激酶、趋化因子等物质，进而引起局部血管扩张和毛细血管通透性增加、血浆渗出、白细胞聚集、水肿、发热。 抑制尿酸生成或促进尿酸排泄已成为高尿酸血症、痛风等疾病的治疗靶点。 临床上治疗痛风的常用药物[5]主要有秋水仙碱、苯溴马隆、丙磺舒、别嘌醇等。 虽有一定的治疗作用，但效果远不能令人满意，并且长期使用往往具有肝肾损伤和胃肠道反应等副作用[6]。 本文就综述了近年来人们越来越关注的中药及其有效成分在高尿酸血症和痛风中作用的研究，以期为中药在高尿酸血症和痛风研究上提供参考。 （一） 对XOD酶活性的调节有报道[7]表明东革阿里醇提物高、低剂量均能抑制氧嗪酸钾构建的HUA大鼠模型肝脏和血清中 XOD 的活性，通过抑制XOD 的酶活性，减少尿酸的生成，减缓高尿酸血症的发生。 这可能是其防治高尿酸血症的作用机制。 桑抹茶[8]干预后，HUA模型大鼠血清、肝组织 XOD 活性及血清尿酸 （SUA）水平显著降低，提示桑抹茶可能通过抑制体内 XOD 活性，起降尿酸作用。 泽泻乙醇提取物[9]能降低HUA模型大鼠SUA与血清肌酐(SCr)的水平，同时抑制XOD酶的活性，表明泽泻乙醇提取物可能是抑制XOD酶活性而发挥降尿酸的作用。 海风藤提取物[10]能明显降低HUA小鼠模型血清尿酸水平，其含有黄酮类化合物山楂总黄酮，能调节 XOD 的活性，海风藤降尿酸机制可能与调节 XOD 的活性有关。 有研究[11-12]表明红茶提取物、高良姜素能降低HUA模型小鼠血尿酸、XOD活性，表明其作用机制可能是通过抑制XOD活性减少尿酸生成，从而降低高尿酸血症小鼠尿酸水平,起到防治高尿酸血症和痛风作用。 （二） 对肾功能的调节有报道 [13]表明赤苍藤醇提物能够显著降低高尿酸血症小鼠的SUA、SCr水平，说明赤苍藤醇提物是通过提高小鼠的肾功能，增加尿酸排泄来降低小鼠体内尿酸水平。 积雪草[14]给药后可以增加HUA模型大鼠 24 h 尿量，降低尿酸浓度和 24 h 尿酸总量，在降低血尿酸的同时增强了经由尿液排泄尿酸的肾脏处理能力。 有报道[15]表明采用免疫组化法、逆转录实时荧光定量 PCR( RT-qPCR) 法分别检测果糖转运体9(Glut9) 在HUA大鼠肾脏的蛋白及基因的表达水平。 结果显示菊苣提取物能降低肾脏 Glut9 的蛋白表达，从而促进肾脏尿酸排泄发挥降尿酸作用，因此Glut9 可能为菊苣提取物干预高尿酸血症的作用靶点。 有报道[16]表明采用RT-PCR、WB等技术研究树舌灵芝对高尿酸血症小鼠的降血糖作用，结果显示灵芝水提取物（GAW）和乙醇提取物（GAE）增加肾脏有机阴离子转运体（OAT1）的m RNA和蛋白质水平，表明树舌灵芝通过促进尿酸转运增强尿酸排泄从而降低尿酸值。 （三） 对XOD酶与肾功能的双重调控有报道[17]表明二妙丸不同配伍比例具有显著降低高尿酸血症大鼠尿素氮（BUA）、XOD水平,并促进肾脏尿酸排泄、改善肾功能，对肾脏功能具有保护作用，其作用机制可能是黄柏中的季胺碱类生物碱通过增加肾脏对尿酸盐的排泄和抑制肾脏对尿酸盐的重吸收而降低血尿酸水平，保护肾脏，另一方面，通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性抑制尿酸的产生。 健脾渗湿方[18]能降低高尿酸血症大鼠UA、BUN、Cr水平、XOD活性，表明健脾渗湿方能降低血清XOD活性，对肾脏功能具有保护作用，从而降低血清BUN、Cr水平。 黄芩素[19]能降低HUA小鼠血清UA，XOD酶活性，减轻肾纤维化，这种作用可能归因于XOD抑制和肾脏的保护。 金线莲[20]乙醇提取物和水提取物对XOD酶具有抑制作用，其水提物可有效改善高尿酸血症小鼠的肾脏功能，可加速尿酸的排泄。 有报道[21]表明茶多酚 (GTP)明显降低HUA 小鼠血尿酸水平、XOD 的活性和表达、肾脏尿酸转运蛋白（URAT1）的表达，增强了 OAT1 和OAT3 的表达。 表明GTP对高尿酸血症降尿酸机制既与抑制 XOD介导的尿酸产生有关，又与调控尿酸转运子介导的尿酸排泄密切相关。 短穗兔耳草[22]提取物能降低大鼠血清尿酸，XOD含量，明显改善肾脏结构，其作用机制可能与调节肾脏尿酸转运体表达和抑制肝脏XOD活性有关。 (四)对炎症因子的影响有研究结果[23]表示，加味四妙汤能明显改善MSU大鼠诱导的痛风性关节炎，其机制可能与抑制大鼠关节TNF-alpha;和PGE2的合成与释放有关。 经Aprior模块分析，发现芙蓉膏[24]和活血药配伍与IgA下降关联，和祛风除湿药配伍与alpha;1-AGP下降关联，和清热解毒药配伍与FSH、CRP下降相关联。 复方水牛角颗粒[25]具有良好的抗急性痛风性关节炎作用，其机制可能为抑制NF-kappa;B 活性、下调 TNF-alpha;、IL-8表达，以减轻组织的炎性损伤。 四妙合萆薢渗湿汤[26]能减轻尿酸钠结晶所致急性痛风性关节炎关节肿胀度,能降低关节局部 IL-1beta;、PGE2 水平。 虎杖-桂枝药对[27]通过影响血中 IL-1beta; 的水平，下调 TLR2、 TLR4、MyD88 基因的表达来发挥改善急性痛风性关节炎大鼠的作用。 宋震坤等[28]观察痛风宁对急性痛风滑膜细胞 COX异构体的影响, 发现痛风宁可通过下调 COX - 1 / COX - 2的表达, 进而抑制PG合成来发挥抗炎镇痛作用。 高岱等[30]研究显示痛风定能够明显抑制急性痛风性膝关节炎家兔模型滑膜组织COX - 2mRNA 的表达, 从而减少AA 转化为 PG的量,进而降低炎性反应, 对急性痛风性关节炎具有较好的防治作用。 (五)其它有报道[31]表明利湿活血方能降低酵母膏、腺嘌呤联合给药构建的高尿酸血症大鼠UA 、丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)含量，升高过氧化物歧化酶(SOD) 、血清总抗氧化能力(T-AOC)活性，表明利湿活血方能降低血清尿酸，提升高尿酸血症大鼠的抗氧化和清除氧自由基的能力，减少脂质过氧化。 唐春萍[32]等研究发现痛风舒胶囊能明显降低大鼠足局部炎症组织中MDA的量, 表明痛风舒胶囊可抑制组织炎症中脂质过氧化产物形成, 其抗炎作用机制可能与抗脂质过氧化有关。 亦有报道称，苏打水[33]呈弱碱性，具有溶解尿酸结晶，抑制尿酸形成，利于代谢产物尿酸盐的分解与排出的功能，可防止血液中尿酸增高，降低痛风症状与痛苦，对关节炎有矫治的作用。 该文献主要对临床痛风患者抽样观察并检测其血尿酸值，发现饮用该品牌苏打水后患者的血尿酸值有显著性下降。 但对于苏打水降尿酸的机制未有报道，对痛风性关节炎的报道鲜有，因此本课题将研究名仁苏打水对慢性高尿酸血症预防作用及对痛风性关节炎的预防作用及其作用机制。 参考文献[1]刘洋. 壳寡糖对小鼠高尿酸血症动物模型的治疗作用研究[D].中国海洋大学,2009.[2]Yang Z, Li F, Jiang L, et al. 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