流感病毒H7N9神经氨酸酶的稳定表达及其在药物筛选中的应用文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一、研究意义

流行性感冒(流感)是一种最常见的病毒性急性呼吸道传染病，至今无法完全加以控制[1,2]。其病原为流行性感冒病毒(流感病毒)，属于正粘病毒科，分甲、乙、丙3个型别，其中甲型流感病毒的致病力最强[3,4]。此次H7N9禽流感病毒在禽类身上呈现弱毒性，感染H7N9的禽（鸡）不发病，仅携带病毒，但在人身上却极具破坏力。因此，H7N9禽流感病毒的特异性药物筛选工作十分重要。

病毒表面主要分布2种蛋白刺突，神经氨酸酶（NA）和血凝素(HA)。NA有9个亚型(N1～N9)，HA有16个亚型(H1～H16)。故，甲型流感病毒理论上可分为144个亚型。HA和NA的重组和重配产生新的病毒是造成流感大流行的重要原因[5]。加强亚型特异性快速沴断、加强监测能力以及时发现流感亚型的变化是应对流感大流行重要基础。引起此次流感的H7N9亚型，其HA和NA蛋白均来源于禽类流感病毒，绝大多数人对其不具有免疫保护作用。因此，针对H7N9禽流感病毒的HA7和NA9的药物将能有效抑制此次的流感流行。

抗流感病毒药物的筛选研究中有多种模型[6]，如全病毒模型、假病毒模型或靶蛋白模型等。我们可以通过分子生物学的方法，将高致病性禽流感病毒H7N9的神经氨酸酶基因转至真核表达载体中，并转染真核细胞，经过筛选后建立神经氨酸酶表达的真核细胞株。它可以作为一种筛选抗病毒药物的模型。为抗流感病毒H7N9药物的研究提供可靠、快捷的平台。

二、研究目标

⑴.采用基因工程的方法构建稳表达流感病毒H7N9神经氨酸酶的真核细胞株。

⑵.建立神经氨酸酶生物学活性的检测方法。

⑶.验证表达的模型的有效性。

⑷.以制备的H7N9病毒神经氨酸酶酶液为筛选平台，筛选有效拮抗流感病毒H7N9NA的活性的药物候选物。