【拟研究或解决的问题】1、 熟悉中药有效成分分离研究的一般流程。
2、 建立大极性物质的分离方法。
3、 用建立的方法对三七药材中大极性成分进行分离研究。
4、 掌握高效液相,TLC法在中药成分分离中的应用。
【研究手段】1、 运用高效液相自动进样仪器确定待分离成分属于哪一极性段。
2、 根据物质所属极性段,运用TLC确定流动相系统。
3、 仪器设备LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津),紫外检测器为日本岛津SPD-20A型;1260 型高效液相色谱系统(美国Agilent公司)、DAD检测器(美国Agilent公司);Agilent柱(4.6100mm,3.5um);Agela柱(1504.6mm,5mu;m);Phenmenex柱(2504.6mm,4mu;m);KQ-250E型超声波清洗器(昆山市仪器有限公司);BS-124S型万分之一电子天平(sartorius,北京赛多利斯仪器系统有限公司);TB-25型十万分之一电子天平(DENVER,北京丹佛妮仪器有限公司)。
4、理论分析大孔吸附树脂对人参二醇组和三醇组皂苷的分离:在三七中,人参皂苷Rb1及Rg1含量较高,而Re、NR1及GY-ⅩⅦ的色谱行为和含量与Rd接近,相对分子量则完全相同。
曾用氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水或正丁醇-乙酸乙酯-水溶剂体系对NR1、Re与Rd进行分离,但效果不好,且流程长。
而采用反相C18柱以甲醇-水作梯度洗脱,一次过柱就能将NR1、Re及Rg1除去,但反相C18填料价格昂贵。
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