1、研究目的及意义 蛋白质可逆磷酸化是生物体内最重要的翻译后修饰之一,且是一个高度动态和广泛存在的过程,磷酸化蛋白组学的研究不仅是分子生物学等基础研究领域的热点,也对阐明疾病发病机制、疾病生物标志物的寻找和新药研发具有重要的应用价值。
磷酸化蛋白的定性研究对更好地理解机体内受磷酸化影响的信号通路机制是十分必要的。
由于在生物样品中发生亚化学计量水品的磷酸化,磷酸化蛋白相对于非磷酸化蛋白通常丰度较低 目前为止,金属氧化物亲和色谱(metal oxide affinity chromatography,MOAC)是常用的磷酸化肽段富集技术之一。
其中,TiO2是应用最为广泛的MOAC材料,其特异性富集磷酸化肽的原理是在酸性条件下磷酸肽中的磷酸根通过桥式双齿配位的形式结合于TiO2表面。
基于金属氧化物对磷酸基团的高亲和力,可以实现对磷酸化肽的高选择性富集。
2、研究内容及目标课题在柠檬酸钠稳定的Fe3O4磁核基础上,以氨水作为催化剂、钛酸四丁酯为前驱体,在使用介孔二氧化硅过渡层的辅助下使用溶胶-凝胶法在Fe3O4@mSiO2表面包覆致密TiO2壳层从而成功制备Fe3O4@SiO2@TiO2核/壳式复合微球。
使用水热结晶法将Fe3O4@SiO2@TiO2中致密TiO2壳层转变成为了具有结晶和介孔结构的mTiO2壳层,详细考察水热结晶反应条件例如水热反应温度、反应时间、溶剂的组成、溶液ph等对制备得到产物形貌和结构的影响,以期得到最优反应参数。
由最优参数制备得到的Fe3O4@SiO2@mTiO2复合微球具有高TiO2含量、高TiO2壳层结晶性、高比表面积及高磁响应性。
在这些优良性质的帮助下, Fe3O4@ SiO2@mTiO2复合微球对于富集磷酸肽同时具有出色的选择性、极高的灵敏度、良好的富集容量和出色的富集回收率。
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