LAMP检测新生隐球菌方法学的建立课题性质 基础研究应用课题radic; 设计型 调研综述 理论研究LAMP检测新生隐球菌方法学的建立课题简介建立了肺炎支原体的重组酶聚合酶恒温扩增检测技术,对该方法、敏感性、特异性等指标进行评价。
LAMP简介2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Res杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术,即环介导等温扩增技术英文名称为Loop-mediated isothermal amplification,受到了世卫组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注,短短几年,该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中,在2009年甲型H1N1流感事件中,日本荣研化学株式会社接受WHO的邀请完成了H1N1环介导等温扩增法检测试剂盒的研制,通过早期快速诊断对防止该病症的快速蔓延起到积极作用。
通过荣研公司近十年的推广,环介导等温扩增技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中,并得到了欧美国家的认同。
该技术的优势除了高特异性、高灵敏度外,操作十分简单,对仪器设备要求低,一台水浴锅或恒温箱就能实现反应,结果的检测也很简单,不需要像PCR那样进行凝胶电泳,环介导等温扩增反应的结果通过肉眼观察白色浑浊或绿色荧光的生成来判断,简便快捷,适合基层快速诊断。
优点:(1)特异性强。
LAMP能从仅相差1个核苷酸的基因标本中,找出相应的靶序列进行扩增。
(2)等温高效。
LAMP在等温条件下扩增,不会因温度改变而造成时间的损失,而且受非靶序列的影响小。
与PCR相比,其检测极限更小,仅为几个拷贝。
(3)耗时短。
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