罗汉果苷及其衍生物的抗肝纤维化活性分析文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

课题背景：

肝纤维化是多数慢性肝病所共有的病理特征，其持续恶化会逐步发展形成肝硬化，最终导致肝癌。虽然在了解肝纤维化的发病机制方面取得了显著进展，但尚未开发出直接预防或逆转纤维化过程的有效药物。由于肝纤维化未得到有效治疗，导致各种肝病进展为肝硬化，所以使得并发急性/慢性肝衰竭和肝细胞癌的风险增加。在中国，每年约有 383 000 人死于肝硬化和肝癌，占全球肝癌死亡的 51%^[1]。由于活纤维化的发病率增加，以及目前药物的无效性和副作用，迫切需要开发新的治疗肝纤维化的药物。罗汉果（葫芦科）具有特别甜的特性，并且最初被中国称为药用和食用物种。罗汉果苷是罗汉果果实中含量和甜度均较高的成分，其甜度是蔗糖的300倍左右，具有许多有益的生物学特性，包括抗炎、抗肥胖、抗糖尿病和抗过敏特性，以及肝保护作用。尽管临床研究较少^[2-4]。本课题综合运用细胞生物学与分子生物学等多学科方法和手段，检测罗汉果苷及其衍生物的抗肝纤维化活性。

文献综述：

肝纤维化是一个可逆的病理生理过程，是继发于各种慢性致病因素引起的肝脏损伤和炎症后组织修复过程中的代偿反应，是慢性肝病发展到肝硬化的必经阶段，表现为肝内细胞外间质( ECM) 成分过度异常地沉积^[5-6]。肝星状细胞（HSCs）的表型变化和成纤维细胞胞外基质（ECM）的分泌是肝纤维化的核心环节。HSCs在肝纤维化中产生ECM，ECM参与了肝损伤后瘢痕组织的形成^[7]。肝纤维化的主要特征是细胞外基质沉积增多和基质降解减少^[8]。在肝脏慢性损伤期间，转化生长因子beta;(TGF-beta;) 、血小板衍生生长因子( PDGF) 、血管内皮生长因子和角化细胞生长因子等各种类型的细胞因子均参与肝纤维化过程，其中 TGF-beta; 介导HSCs 激活和转化为活化的肌成纤维细胞，而 PDGF是 HSCs 最有效的促分裂原，两者使肌成纤维细胞具有收缩性和促炎作用^[9-10]。肝纤维化是涉及肝实质和非实质细胞的一种复杂过程，其中也包括免疫细胞，免疫细胞具有促进纤维化进展和参与纤维化溶解的双重作用。因此，对肝纤维化的抑制和降解过度增生的ECM及促进炎性环境的转变有作用的药物成为抗肝纤维化的研究热点。

罗汉果（葫芦科）具有特别甜的特性，并且最初被中国称为药用和食用物种。罗汉果苷是罗汉果果实中含量和甜度均较高的成分，其甜度是蔗糖的300倍左右，具有许多有益的生物学特性，包括抗炎、抗肥胖、抗糖尿病和抗过敏特性，以及肝保护作用。研究表明，罗汉果苷对小鼠急性肺损伤炎症有抑制作用^[12]。而急性肺损伤炎症是一种由多种炎症细胞参与的病变反应，其特征在于由过度的ECM沉积引起的肺结构的进行性和不可逆性的破坏，最终导致呼吸衰竭。而肝纤维化表现为肝内细胞外间质( ECM) 成分过度异常地沉积。两者病变过程类似，把这些证据放在一起，我们假设罗汉果苷对肝纤维化有一定的治疗作用，并对罗汉果苷及其衍生物的抗肝纤维化活性进行分析比较，旨在开发出新的抗肝纤维化临床药物。

罗汉果苷是与5-6个葡萄糖连接的三萜类苷结合体，是一种三萜烯葡萄苷，其醇衍生物对癌细胞有抑制作用，具有抑癌活性。所以假设其具有抗炎活性，并对肝纤维化有一定的治疗作用，检测其抗肝纤维活性，与罗汉果苷的抗肝纤维化活性进行比较分析，开发更有效的抗肝纤维化临床药物，降低肝硬化和肝癌的病发率。

实验方法^[12]：

1. 提取罗汉果苷
2. 罗汉果苷醇衍生物的合成及提纯。
3. 用用玉米油稀释CCl₄腹腔注射诱导小鼠肝纤维化的实验模型。
4. 将小鼠随机分为4组：对照组、CCl₄诱导肝纤维化模型组、罗汉果苷组、醇衍生物组、阳性药物组（水飞蓟素）。对照组小鼠注射玉米油。每天给小鼠灌胃给予水飞蓟素、罗汉果苷、醇衍生物。所有的老鼠都在第八个周末被处死。将血清保存于80°C进行肝功能检查。快速取出肝脏，其中部分肝组织固定在10%福尔马林中进行组织病理学检查，其余组织保存在-80°C。
5. 组织学分析，对肝组织的炎症和纤维化程度进行分析。

参考文献：

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