H1606T药物一致性评价有关物质方法学研究文献综述

摘要：药物有关物质研究具有重要意义。

通过对比各国药典及进口注册标准，筛选出合适的色谱条件，用于H1606T有关物质的检测，并对筛选优化后的分析方法进行方法学验证。

中国药典杂质限度水平低于进口注册标准，中国药典的要求除RRT为0.30之前的峰外，单杂le;1.5%； 总杂le;4.5%，0.1%以下不积分；进口注册标准规定为杂质RM39001、RM39342le;0.5%；其他le;0.5%，总杂le;2.5%，0.05%以下不积分。

关键词：有关物质一致性评价高效液相色谱法1.一致性评价的意义根据国家食药监总局发布的关于落实《国务院办公厅关于开展仿制药质量和疗效一致性评价的意见》的相关规定：（一）化学药品新注册分类实施前批准上市的仿制药，包括国产仿制药、进口仿制药和原研药品地产化品种，均须开展一致性评价。

（二）凡2007年10月1日前批准上市的列入国家基本药物目录（2012年版）中的化学药品仿制药口服固体制剂，原则上应在2018年底前完成一致性评价。

（三）上述第（二）款以外的化学药品仿制药口服固体制剂，企业可以自行组织一致性评价；自第一家品种通过一致性评价后，三年后不再受理其他药品生产企业相同品种的一致性评价申请。

通过对比自研制剂与原研制剂进行对比研究，确定合适的分析方法，用于有关物质的检测，并通过筛选原料及制剂工艺，控制自研产品的杂质水平不得低于原研制剂水平或与原研制剂相当，以期得到高质量的仿制药。

2.各国药典标准标准 日本药典JP16原料药 BP2013EP9.0IP2010原料药色谱柱 C18柱（25cm*4.6mm，5mu;m） C18柱（15cm*4.6mm，5mu;m）流动相 流动相A：将磷酸二氢铵溶液（0.17g/mL）-水（200:510）用2M氢氧化钠溶液调节pH至5.3(0.42M)，再加入315ml乙腈混匀(约等于70：30)；流动相B：乙腈-水（70:30）T(min) A相 B相0-38 100 038-39 100→90 0→1039-80 90 10 A相：磷酸二氢铵溶液（59.7g/l(0.52M)磷酸二氢铵溶液，pH4.3）-乙腈（74:26）；B相：乙腈-水（70:30）.梯度洗脱：T(min) A相 B相0-50 100 050-51 100→90 0→1051-80 90 1080-81 90→100 10→081→100 100 0lambda;（nm） 205 205柱温 25℃ 15℃流速 调节流速使主峰约为21min 1.1ml/min进样量 20mu;l 20mu;l系统适用性溶液 灵敏度检测溶液：将对照品溶液稀释5倍;系统适用性溶液：H1606T对照品和N-去甲基H1606T（杂质F）浓度均为0.05mg/ml H1606T系统适用性对照品2mg至1ml量瓶，用溶剂稀释即得。

系统适用性要求 灵敏度检测溶液中主峰面积与对照品溶液主峰面积的比值在15%~25%之间；系统适用性溶液：二者分离度不得小于6.0；连续进样5针对照品溶液峰面积的RSD不得大于2.0% H1606T保留时间约为22min；杂质A0.28；杂质B0.31；杂质C0.33；杂质D0.62；杂质E0.67；杂质F0.83;杂质G1.15；杂质K1.7；杂质H1.85；杂质J2.65；杂质I3.1；杂质G与主成分峰谷比最小为2.0。

溶剂 流动相A（相当于EP9.0的溶剂） 30ml乙腈加70ml磷酸二氢铵溶液（48.6g/L,0.42M）,调节pH (用氢氧化钠试液)至5.3保留时间 80min 100min对照溶液 0.5%对照品溶液（对照品配制，0.02mg/ml） 1%对照品溶液（对照品配制，0.02mg/ml）供试品溶液 4mg/ml 2mg/ml（样品室：8℃）限度 相对保留时间1.05的杂质（可能为杂质G）不得过1.0%；其余杂质不得过0.5%. 杂质G：1.0%；杂质ABCDEFHIJ:0.5%； 总杂不得过3.0% 总杂le;3.0% / 0.05%以下不积分 方式：与0.5%对照品溶液相比 方式：与1%对照品溶液相比标准 H1606T片进口注册标准（JX20100316） H1606T片2015版中国药典标准色谱柱 C18柱 C18柱流动相 0.067mol/l磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节pH至6.5）-乙腈（65:35） 0.067mol/l磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节pH至6.5）-乙腈（65:35）lambda;（nm） 210 210柱温 40℃ 流速 1.0ml/min 进样量 20mu;l 20mu;l系统适用性溶液 RM39001、RM39342和H1606T混合溶液，浓度均为10mu;g/ml H1606T和杂质A标准品混合溶液（浓度为1mg/ml）系统适用性要求 H1606T与各杂质峰及两杂质峰间的分离度均应符合规定 H1606T峰保留时间约为14min，其与杂质A峰间的分离度应不小于15.0，H1606T峰与RRT为0.95处的杂质峰间的分离度应不小于1.0，与RRT约为1.2处杂质峰间的分离度应不小于2.0溶剂 流动相 流动相保留时间 3倍主峰 4倍主峰对照溶液 1%对照品（对照品配制，0.02mg/ml） 1%供试品溶液（供试溶液中的杂质与对照溶液峰面积的比值）供试品溶液 2mg/ml 2mg/ml限度 RM39001、RM39342le;0.5%；其他le;0.5% 除RRT为0.30之前的峰外，单杂le;1.5%； 总杂le;2.5% 总杂le;4.5%。